师：同学们好，很高兴和大家一起学习今天的课程。通过上节课的学习，我们已经了解了显微镜的使用方法和成像原理。它是利用光学原理来观察物体，光的通路需在一条直线上。光源发出的光线，要先经过反光镜反射，然后依次通过遮光器上的光圈、通光孔、观察材料、物镜、镜筒以及目镜，最终进入人眼。经过物镜、目镜两次放大作用，我们才能观察到物象。整个光的路径必须通透，观察材料也要满足透光性，即薄而透明。
观察材料往往要用玻璃片固定好，做成玻片标本，然后对准通光孔进行观察。玻片标本包含两部分，托载标本的叫载玻片，覆盖标本的叫盖玻片。常见的玻片标本有临时和永久两种类型。例如，临时装片是取新鲜的少量生物材料放在载玻片上的水滴或其他液体中，再盖上盖玻片做成的玻片标本，制作临时装片是为了满足用显微镜短时间观察的需要。而永久装片是对实物标本进行脱水、切薄、染色等一系列特殊处理后，用胶密封在玻片下，可以长期保存的玻片类型。由于需要观察的生物材料不尽相同，处理办法也不一样。根据生物材料的来源和处理方式，玻片标本还有另一种分类方法，分为装片、涂片和切片。
装片是用撕下或挑取的少量生物材料制成，比如人的口腔上皮细胞装片是从人的口腔内侧壁刮取细胞，洋葱鳞片叶内表皮细胞装片是从洋葱的内表皮撕取细胞。一些个体微小的生物也可以直接做成装片，像酵母菌装片、草履虫装片等等。涂片是用液体的生物材料经过涂抹制成的，例如人血涂片、细菌涂片等等。切片是从生物体材料上切取的薄片制成，比如动物体的心肌切片、植物叶的切片等等。装片、涂片和切片也都可以制作成临时的或永久的。
本节课我们以观察人的口腔上皮细胞为例，了解动物细胞临时装片的制作方法，请大家认真观看视频，完成学习任务。
制作并观察人口腔上皮细胞临时装片，首先把载玻片和盖玻片擦拭干净。然后在载玻片中央滴一滴生理盐水，用凉开水漱净口腔，用消毒牙签在口腔内侧壁轻轻刮几下。把牙签附有碎屑的一端放在载玻片的生理盐水中轻轻涂抹几下，要涂抹均匀，以便细胞分散开，方便观察。用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，缓缓放下盖玻片在水滴上，这样可以避免产生气泡。在盖玻片一侧滴一滴碘液，用吸水纸垂直在盖玻片的另一侧吸引，这种操作方式称为引流法。染色剂不宜一次滴加过多，可以少量多次进行，使碘液浸润标本的全部，最后借助显微镜可以观看到人的口腔上皮细胞的形态结构。
本实验中使用的材料用具有载玻片、盖玻片、牙签、吸水纸、纱布、碘液、生理盐水、凉白开、镊子以及显微镜。其中凉白开可以用清水代替。制作临时装片第一步是擦拭，用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净，使其表面不留有任何污渍或纱布纤维。擦拭玻片的正确操作是，另一只手用纱布包裹玻片，沿着一个方向擦拭；也可以一手轻轻捏住对边，另一只手用拇指和食指的指腹隔着纱布向同一个方向揉搓。若有明显油渍，可蘸取少量酒精，直至擦拭干净为止。擦拭的目的是去除玻片上的脏东西，防止有污点影响观察效果。载玻片和盖玻片都是玻璃制品，边缘锋利，使用时要注意安全，尤其是盖玻片很薄，擦拭时不要用力过猛而捏碎，以免扎伤手指。
第二步是滴加生理盐水。把载玻片平放在实验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴生理盐水，注意滴管不要触碰玻片。要注意一滴的量既不要太多，也不能太少。太多了容易使实验材料漂浮移动，液体溢出，会污染实验台和载物台，甚至污染物镜镜头；太少了则不易使细胞分散开，而且生物材料容易变得干燥。此外，如果液体滴加偏少，盖玻片无法完全紧贴载玻片，也容易有空气从四周进入。
为什么要滴加生理盐水呢？这和人体内细胞所处的环境有关，人体内的液体环境是有一定浓度的，我们以清水的浓度为零。生理盐水中含有一种叫做氯化钠的物质，浓度为0.9%。人体细胞所处液体环境的浓度接近0.9%的氯化钠溶液浓度，所以滴加生理盐水与人体内的液体环境相似，能短时间维持动物细胞形态不变。如果将口腔上皮细胞放入清水中，水会由低浓度向高浓度流动，细胞就会由于水分进入而膨胀甚至破裂，导致我们无法观察到完整的细胞形态和结构。相应的，如果将口腔上皮细胞放入浓度更高的液体中，细胞中的水就会流出，发生失水皱缩的现象，也影响观察。
第三步，先用清水漱口，清除口腔中的食物碎屑，然后用消毒牙签粗的一端在口腔侧壁上轻轻刮几下，获取观察所需的上皮细胞。口腔上皮细胞易脱落、易获取，刮取一小部分不会对人体造成不良影响，是十分理想的动物细胞观察材料。刮取时要注意力度，太轻可能无法获取材料，太重又容易刮破口腔，可以让牙签平行于口腔侧壁进行刮取，这样更安全。选择消毒牙签粗的一端也是这个原因，更加安全。
第四步，将牙签上附着的碎屑放在载玻片的生理盐水中，涂抹几下，可以使细胞分散均匀，避免出现重叠，影响观察效果。
第五步是盖盖玻片，盖玻片可以压平生物材料，使细胞在一个平面上便于聚焦。用镊子夹起盖玻片，不能用手触碰，避免留下指纹，影响观察效果。使盖玻片的一边先接触液滴，然后缓慢地覆盖到液滴上，越慢越好，避免出现气泡，影响观察效果。气泡肉眼可见，是透明的小圆圈，但是在显微镜下看到的是边缘呈黑色的放大的圆圈，压一压盖玻片还能移动、变形或消失。
第六步是染色。在盖玻片一侧滴一滴碘液，用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使碘液扩散到整个标本。这种一侧滴加碘液、对侧吸引的方法叫引流法。注意，碘液不能直接滴加在盖玻片上，这样做染液无法进入生物材料。滴加碘液时也要注意一滴的量，过多容易溢出，污染实验台和载物台，甚至污染物镜镜头，多余的碘液要及时用吸水纸吸走。碘液滴加过少则无法浸润全部标本，达不到染色效果，要及时补充。如果染色后颜色太浅，也可以多次重复这一步骤。
碘液的作用是使细胞的结构着色，可以更清晰地分辨细胞内部各部分结构。透明的生物材料往往要染色后观察，本身有颜色的可以不进行染色，根据观察需要再决定是否有这一步骤。最后将制作完成的临时装片放到显微镜下观察，因为有液体，注意玻片标本要平拿平放，显微镜的镜身也尽量不要倾斜，防止盖玻片和生物材料滑落。